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白細胞稀釋液(計數液)使用步驟
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
白細胞(White Blood Cell,WBC)是血液中的一種常見(jiàn)的免疫細胞。
白細胞稀釋液(WBC Dilution)主要由乙酸、亞甲藍等組成,主要用于白細胞計數,但并不能區分不同種類(lèi)的白細胞,作用原理是血液經(jīng)白細胞稀釋液稀釋后成熟紅細胞全部被溶解,充入計數池后顯微鏡下計數一定體積內白細胞數,換算求出每升血液中白細胞的數量。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
自備材料:
1、新鮮全血、微量吸管、血球計數板、血蓋片、顯微鏡、小號試管
操作步驟(僅供參考):
1、取小號試管,加 WBC Dilution 0.38ml。
2、用潔凈干燥微量吸管取末梢血 20μl,擦去管外余血后加至 WBC Dilution 底部,輕輕將血放出,再輕吸上層清液清洗吸管 2~3 次,立即混勻,稀釋比例為1:20,也可以按照 1:10 或 1:40 的比例稀釋。
3、待紅細胞完-全破壞,液體變?yōu)樽睾稚,再次混勻后充池,注意產(chǎn)生氣泡或外溢,室溫靜置 2~3min,待白細胞沉淀。
4、置于顯微鏡低倍鏡下依次計數四角和 4 個(gè)大方格內的白細胞數,壓線(xiàn)細胞按“數上不數下,數左不數右”的原則進(jìn)行計數。
計算:白細胞數/L=(N÷4)×10×20×106=(N÷20)×109
注意事項:
1、采血時(shí)不能過(guò)于擠壓,針刺深度應適當。
2、小試管、計數板均應清潔,以免誤認細胞。
3、在參考范圍內大方格間的細胞數不應相差 8 個(gè)以上,兩次重復計數相差不應超過(guò)10%。4、白細胞數量過(guò)多時(shí)可加大稀釋倍數,白細胞數量過(guò)少時(shí)可計數 8 個(gè)大方格的白細胞數或大量取血。
5、白細胞稀釋液僅可計數白細胞,并不能區分不同種類(lèi)的白細胞,如需區分白細胞應選用瑞氏染色液或者瑞氏-姬姆薩復合染色液。
6、試劑開(kāi)封后請盡快使用,以防影響后續實(shí)驗效果。
7、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
原創(chuàng )作者:上海信帆生物科技有限公司
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