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免疫熒光檢測(IFC)服務(wù)及相關(guān)生物學(xué)代測服務(wù)
免疫熒光檢測（IFC）
分類(lèi)：免疫熒光檢測分直接法、間接法、夾心法和補體法。
一般試驗方法：
將標記的特異性熒光抗體，直接加在抗原標本上，經(jīng)一定的溫度和時(shí)間的染色，用水洗去未參加反應的多余熒光抗體，室溫下干燥后封片、鏡檢。
如檢查未知抗原，先用已知未標記的特異抗體（抗體）與抗原標本進(jìn)行反應，用水洗去未反應的抗體，再用標記的抗抗體（第二抗體）與抗原標本反應，使之形成抗原—抗體—抗體復合物，再用水洗去未反應的標記抗體，干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知抗體，則表明抗原標本是已知的，待檢血清為抗體，其它步驟的抗原檢查相同。
直接法一般實(shí)驗步驟：
1） 滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，10min后棄去，使標本保持一定濕度。
2） 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時(shí)間（參考：30min）。
3）取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過(guò)0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸3-5 min，不時(shí)振蕩。
4）取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5）立即用熒光顯微鏡觀(guān)察。觀(guān)察標本的特異性熒光強度，一般可用“+”表示：
�。�-）無(wú)熒光；（±）極弱的可疑熒光；（+）熒光較弱，但清楚可見(jiàn)；（++）熒光明亮；（+++ －－++++）熒光閃亮。待檢標本特異性熒光染色強度達“++”以上，而各種對照顯示為（±）或（-），即可判定為陽(yáng)性。
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間接法一般實(shí)驗步驟：
1）滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于已知抗原標本片，10min后棄去，使標本片保持一定濕度。
2）滴加以0.01mol/L，pH7.4的PBS適當稀釋的待檢抗體標本，覆蓋已知抗原標本片。將玻片置于有蓋搪瓷盒內，37℃保溫30min。
3）取出玻片，置于玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗1-2次，然后按順序過(guò)0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸5min，不時(shí)振蕩。
4）取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，滴加一滴一定稀釋度的熒光標記的抗人球蛋白抗體。
5）將玻片平放在有蓋搪瓷盒內，37℃保溫30min。
6）重復操作3。
7）取出玻片，用濾紙吸去多余水分，滴加一滴緩沖甘油，再覆以蓋玻片。
8）熒光顯微鏡高倍視野下觀(guān)察，結果判定同直接法。
服務(wù)內容
提供免疫熒光染色服務(wù)，并對染色后結果進(jìn)行顯微照相。
樣品要求
石蠟切片/冰凍切片/細胞爬片。
目的蛋白一抗。
終產(chǎn)品
染色后的切片；
每張切片提供一張照片；
實(shí)驗報告。
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更新時(shí)間：2024/6/25 16:39:42
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